十萬(wàn)級(jí)無(wú)菌車(chē)間清潔驗(yàn)證

清潔驗(yàn)證相關(guān)的方法一般包括取樣方法與清潔樣品分析方法。取樣方法回收率代表了取樣設(shè)計(jì)的適用性和可靠性，而適當(dāng)?shù)姆治龇椒☉?yīng)能夠充分檢測(cè)相關(guān)殘留物，檢測(cè)結(jié)果決定清潔程序是否可靠或需要進(jìn)一步改進(jìn)。

為了評(píng)估清潔效果，有必要對(duì)設(shè)備的產(chǎn)品接觸表面進(jìn)行取樣并確定存在的殘留量，適當(dāng)?shù)娜臃椒ㄊ且粋€(gè)清潔驗(yàn)證計(jì)劃的基本要素，本節(jié)主要描述如何選擇適當(dāng)?shù)娜臃椒叭踊厥章黍?yàn)證問(wèn)題。

（1）取樣方法選擇

取樣方法的選擇取決于殘留物的性質(zhì)、殘留限度以及所需要的分析方法，清潔驗(yàn)證常用的取樣方法包括:直接表面取樣法;淋洗取樣法；擦拭取樣法;微生物取樣法。

擦拭法、淋洗法以及目檢都是可以接受的取樣方法，這些方法有它們自身的優(yōu)點(diǎn)與局限，在一個(gè)給定的驗(yàn)證方案中，為了充分確認(rèn)設(shè)備清潔是可接受的，可以采用多種取樣方法，例如“淋洗取樣與目檢結(jié)合”或者“淋洗取樣、擦拭取樣以及目檢相結(jié)合”。

①直接表面取樣法    直接表面取樣法包括儀器法及目檢法，應(yīng)注意直接表面取樣法包括了取樣及分析方法。

a.目檢法    一個(gè)清潔過(guò)程應(yīng)從生產(chǎn)設(shè)備表面去除可見(jiàn)殘留物，目檢存在局限性，如一些設(shè)備的表面（如管路）無(wú)法直接觀察，一些光學(xué)設(shè)備如鏡子或者內(nèi)窺鏡，連同輔助照明一起有助于進(jìn)行目檢。一般來(lái)說(shuō)需要目檢的表面應(yīng)干燥，因?yàn)檫@代表著目檢的較差條件。

b.儀器法    儀器法通常采用一個(gè)通過(guò)光纖由纜連接至分析儀器的表面探針。例如，可能是一個(gè)通過(guò)光纖電纜連接至傅里葉變換紅外光譜儀的衰減全反射探針。這種取樣法的優(yōu)勢(shì)是不需要像擦拭法和淋洗法那樣從表面取殘留物進(jìn)行分析（如擦拭以及淋洗取樣）。因此也不需要單獨(dú)的取樣回收率研究。這種方法的主要缺點(diǎn)是光纖探頭的長(zhǎng)度有限以及被取樣表面需相對(duì)平坦（因此很多較差條件的位置不能采用這種方法取樣）。

②淋洗取樣法    淋洗取樣法是指在相關(guān)設(shè)備表面采用流動(dòng)的溶劑（水、含水溶液、有機(jī)溶劑或者水/有機(jī)溶劑混合物）去除殘留物，然后再檢測(cè)淋洗液中殘留量，淋洗樣本的采集應(yīng)考慮溶解度、位置、淋洗時(shí)間以及淋洗體積

③擦拭取樣法    拭子以及擦拭取樣都采用纖維材料（常用）擦拭表面，擦拭過(guò)程中表面的殘留物會(huì)被轉(zhuǎn)移到纖維材料上。然后冉將纖維材科置于溶劑中，將殘留物轉(zhuǎn)移到溶劑中去。然后用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的合適方法分析溶劑中旳殘留物。拭子的纖維材料是一種帶有塑料把手的紡織物（針織、機(jī)織或無(wú)紡布)。擦拭巾是機(jī)織或無(wú)紡布類(lèi)的纖維材科，用來(lái)對(duì)表面進(jìn)行手工取樣。用鉗子鉗住進(jìn)行表面擦拭的棉球或棉墊是一種特殊尖型的拭子。選擇拭子或擦拭巾前需要評(píng)估拭子性質(zhì)，如析出物和脫落物。表面殘留物的回收率還取決于拭子頭部或擦拭巾的大小和形狀以及把手的性質(zhì)（例如彈性和長(zhǎng)度）。

④微生物取樣法    生物負(fù)載取樣可采用淋洗或擦拭法，也可采用接觸碟法。應(yīng)關(guān)注擦拭法以及淋洗法中的樣品溶液，對(duì)于擦拭法應(yīng)采用無(wú)菌溶液，如磷酸鹽緩沖液。對(duì)于淋洗法，用無(wú)菌水對(duì)大型設(shè)備進(jìn)行取樣一般是不現(xiàn)實(shí)的。然而對(duì)于小部件的提取取樣，首選使用無(wú)菌水或無(wú)菌溶液。對(duì)于大型設(shè)備一般選用純化水或注射用水進(jìn)行淋洗取樣，結(jié)果需與同一用水點(diǎn)所取空白對(duì)照進(jìn)行比較。生物負(fù)載的淋洗水取樣應(yīng)使用無(wú)菌取樣容器，為了避免對(duì)樣品的污染，同潔凈室生物負(fù)載取樣相同，任何微生物取樣都需要采用無(wú)菌技術(shù)。

（2）取樣回收率驗(yàn)證

取樣回收率驗(yàn)證通常需要證明采用適當(dāng)?shù)姆治龇椒ê腿映绦颍沙浞譁y(cè)量或量化設(shè)備表面的殘留物。這些研究為殘留物測(cè)量的取樣以及分析方法建立提供了科學(xué)依據(jù)。它的目的是建立一個(gè)可重現(xiàn)的設(shè)備表面回收率。以下探討4種類(lèi)型的取樣回收率：控拭取樣回收率、淋洗取樣回收率、目檢回收率以及生物負(fù)裁。對(duì)于擦拭以及淋洗取樣面言，回收率研究可以作為分析方法驗(yàn)證的一部分，或者一旦確定分析方法能夠檢測(cè)溶減中殘留物，可單獨(dú)講行研空。取樣回收率研究是實(shí)驗(yàn)室研究，需要不同被取樣設(shè)備材質(zhì)（加不銹鋼、玻璃、PTFE 以及 EPDM) 試樣，并在上面涂布待檢測(cè)殘留物。

擦拭取樣回收率研究中，將已知濃度的殘留溶液均勻涂布在材質(zhì)試樣上，自然晾干，采用一定的擦拭方法進(jìn)行取樣，選用合適的溶劑提取棉簽上的殘留，然后檢測(cè)提取液中殘留物的數(shù)量。回收量與材質(zhì)試樣上的加入量之比就是取樣百分回收率。由于擦拭屬于人工操作，通常每人需要重復(fù)3次回收率研究。每個(gè)殘留物和表面類(lèi)型的組合至少需要兩個(gè)人進(jìn)行擦拭回收率研究。研究建立的回收率可以通過(guò)不同的方式定義，但通常定義為任意一個(gè)擦拭取樣人員的較低平均回收率。一個(gè)可接受的拭子回收率取決于如何進(jìn)行拭子回收率實(shí)驗(yàn)。如果在回收率研究確認(rèn)取樣方法時(shí)，沒(méi)有對(duì)殘留限度或分析結(jié)果進(jìn)行修正，回收率通常要求70%或更高。如果回收率用于修正殘留物限度或分析結(jié)果，回收率一般要達(dá)到50%或以上。

②淋洗取樣回收率    淋洗取樣回收率研究同擦拭回收率相似，將目標(biāo)殘留物溶液涂布在材質(zhì)試樣上自然晾干。對(duì)于擦拭取樣的回收率,必須嚴(yán)格執(zhí)行預(yù)定擦拭步驟，與之相反,對(duì)于淋洗取樣,無(wú)法在實(shí)驗(yàn)室中準(zhǔn)確地重復(fù)淋洗步驟（除了提取取樣的特殊情況）。然而在實(shí)驗(yàn)室中模擬淋洗程序是可行的，在可能的情況下，模擬淋洗的條件應(yīng)該同實(shí)際的設(shè)備淋洗條件相同,包括淋洗溶劑以及淋洗溶劑溫度的選擇。其他情況下,應(yīng)該選擇與設(shè)備淋洗相同或較差的淋洗條件，例如回收率研究中溶劑量與被取樣表面積之比應(yīng)該同設(shè)備淋洗時(shí)相同或更低。

③目檢回收率    這個(gè)過(guò)程實(shí)際上是確定一個(gè)定量的”目視檢測(cè)限”。如果目檢只是作為擦拭或沖洗取樣的補(bǔ)充，則可以但不要求確定“目視檢測(cè)限”。指定觀察條件下的目視檢測(cè)限可以通過(guò)在設(shè)備材質(zhì)試樣上涂布不同濃度（ug/cm²）的殘留物來(lái)確定，并需要一組訓(xùn)練有素的觀察者來(lái)確定表面殘留物明顯可見(jiàn)時(shí)的較低殘留水平。目視檢測(cè)限的意義在于，如果在清潔驗(yàn)證方案中，在同樣（或更嚴(yán)格）的觀察條件下確定設(shè)備表面已目檢潔凈，則可認(rèn)為實(shí)際殘留水平低于目視檢測(cè)限。適當(dāng)?shù)挠^察條件包括距離、光照以及觀察角度。目視檢測(cè)限取決于殘留物性質(zhì)、表面性質(zhì)（例如，不銹鋼對(duì)PTFE) 以及觀察者的視力。

④生物負(fù)載取樣回收率    對(duì)于微生物取樣，不適合進(jìn)行回收率研究以確定表面回收率，原因之一是微生物檢測(cè)的計(jì)數(shù)問(wèn)題通常以“菌落形成單位”進(jìn)行計(jì)數(shù)而不是單個(gè)微生物。第二個(gè)原因是在一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的取樣回收率研究中，當(dāng)材質(zhì)試樣晾干時(shí)微生物會(huì)失去生存能力。第三個(gè)原因是不清楚選用哪種微生物進(jìn)行回收率研究。第四個(gè)原因是通常生物負(fù)載限度已明顯低于可能影響產(chǎn)品質(zhì)量或工藝性能（如在線(xiàn)滅菌）的水平，因此即使回收率低（<50%)，不引入回收因子也不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量和/或工藝性能。

本文由中凈環(huán)球凈化CCG(azym.com.cn)提供，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處。