無(wú)菌室的建設(shè)裝修要求

無(wú)菌室一般是在微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)專辟一個(gè)小房間，可以用板材和玻璃建造，面積不宜過大4～5m²即可，高2.5m左右；無(wú)菌室的設(shè)計(jì)可因地制宜，但應(yīng)具備下列基本條件：室內(nèi)的地面、墻壁須平整，不易藏污納垢，便于清洗；要求嚴(yán)密、避光，隔板以用玻璃為佳，但為了在使用后排濕通風(fēng)，應(yīng)在頂部設(shè)立百葉排氣窗，窗口加密封蓋板，可以啟閉，也可在窗口用數(shù)層紗布和棉花蒙罩，側(cè)面底部應(yīng)設(shè)進(jìn)氣孔，最好能通入過濾的無(wú)菌空氣。無(wú)菌室一般應(yīng)有里外兩間，較小的外間為緩沖間，以提高隔離效果，應(yīng)安裝拉門，以減少空氣流動(dòng)，必要時(shí)在向外一側(cè)的玻璃隔板上安裝一個(gè)雙層的小型玻璃櫥窗，便于內(nèi)外傳遞物品，減少進(jìn)出無(wú)菌室的次數(shù)。室外要設(shè)一個(gè)緩沖間，緩沖間的門和無(wú)菌室的門不要朝向同一方向，以免氣流帶進(jìn)雜菌，無(wú)菌室和緩沖間都必須密閉。室內(nèi)裝備的換氣設(shè)備須有空氣過濾裝置，室內(nèi)應(yīng)有照明、電熱和動(dòng)力用的電源；工作臺(tái)臺(tái)面應(yīng)抗熱、抗腐蝕，便于清洗消毒；可采用橡膠板或塑料板鋪數(shù)臺(tái)面，工作臺(tái)的臺(tái)面應(yīng)該處于水平狀態(tài)，無(wú)菌室和緩沖間都裝有紫外線燈，和紫外線燈距離工作臺(tái)面1m。無(wú)菌室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間和緩沖間，操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí)，室內(nèi)溫度保持在20～24℃，濕度保持在45%～60%，超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)；無(wú)菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染，嚴(yán)防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染，已污染者應(yīng)停止使用；室內(nèi)應(yīng)備有工作濃度的消毒液，如5%的甲醛溶液，70%的酒精溶液，0.1%的新潔爾滅溶液等；應(yīng)定期用適宜的滅菌清潔，以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求，需要帶入無(wú)菌室使用的儀器、器械、平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法滅菌。工作人員進(jìn)入前，須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用的工作服、鞋、帽子、口罩和手套（或用70%的酒精再次擦拭雙手），方可進(jìn)入進(jìn)行操作。

無(wú)菌室使用前須打開紫外燈輻照滅菌30min以上，并且同時(shí)打開超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)，操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理，再用紫外燈輻照滅菌20min。供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開啟，以防污染，檢查前用70%的酒精棉球消毒外表面，每次操作過程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。吸取菌液時(shí)，須用洗耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。接種針每次使用前后，須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后方可接種培養(yǎng)物，帶有菌液的吸管、試管、培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒，24h后取出沖洗。凡帶有活菌的物品，須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。無(wú)菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)，在超凈工作臺(tái)開啟的狀態(tài)下，取內(nèi)徑90mm的無(wú)菌培養(yǎng)皿若干，無(wú)菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15mL，放至凝固后，倒置于30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，證明無(wú)菌后，取平板3～5個(gè)，分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露30min后，倒置于30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，取出檢查。100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個(gè)菌落，10000級(jí)潔凈室平均不得超過3個(gè)菌落，如超過限度，應(yīng)進(jìn)行徹底消毒，直至重復(fù)檢查合乎要求為止。中凈環(huán)球凈化可提供潔凈車間、凈化廠房等的咨詢、規(guī)劃、設(shè)計(jì)、施工、安裝、改造等配套服務(wù)。

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